检验结果是临床医师在诊疗过程中所需要的重要信息,临床医师可以根据这些检验结果及病人的临床情况来区分疾病的不同阶段,观察疾病的变化,判断预后或观察疗效。所以分析前阶段样本的质量保证是直接关系到检验结果能否真实客观地反应患者当前病情的一个重要环节。
1.病人状态
一般需在安静状态下采集标本,如患者处于高度紧张的状态时,可使血红蛋白、白细胞增高。由于劳累或受冷等刺激、也可见白细胞的增高。运动能影响许多项目的测定结果。活动的影响可分暂时和持续性两类。暂时性影响如使血浆脂肪酸含量减少;丙氨酸、乳酸含量增高。持续性影响,如激烈运动后使CK、LDH、ALT、AST和GLU等的测定值升高,有些恢复较慢,如ALT在停止运动1h后测定,其值仍可偏高30%~50%。
2.饮食
多数试验要求在采血前禁食12h,因为饮食中的不同成分可直接影响实验结果。
(1) 餐后血液中TG、ALT、GLU、BUN、Na等均可升高,进食高蛋白或高核酸食物,可以引起血中的尿素氮(BUN)和尿酸(UA)的增高。进食高脂肪食物后采集的血液样本,其血清会出现浑浊,可影响许多检验测定的正确性。甚至喝含咖啡的饮料,可引起淀粉酶(AMS)、AST谷丙转氨酶(ALT)、碱性磷酸酶(ALP)等升高。但空腹时间过长,会使GLU,蛋白质降低,而胆红素升高。
(2) 高脂餐后2~4h采血,多数人ALP含量增高,主要来自肠源性同工酶,且与血型有密切关系,O型或B型兼为Le+分泌型者增高更为明显。
(3) 高蛋白质饮食可使血浆尿素、血氨增加,但不影响肌酐含量。
(4) 高比例不饱脂肪酸食物,可减低胆固醇含量;香蕉、菠萝、番茄可使尿液5-羟色胺增加数倍。
(5) 含咖啡因饮料,可使血浆游离脂肪酸增加,并使肾上腺和脑组织释放儿茶酚胺。食物如含有动物血液,可引起粪隐血假阳性。
(6) 饮酒后使血浆乳酸、尿酸盐、乙醛、乙酸等增加,长期饮酒者高密度脂蛋白胆固醇偏高、平均血细胞体积增加、谷氨酰转肽酶亦较不饮酒的病人为高,甚至可以将这三项作为嗜酒者的筛选检查。
(7) 吸烟:瘾大者血液一氧化碳血红蛋白含量可达8%,而不吸烟者含量在1%以下。此外,儿茶酚胺、血清可的松亦较不吸烟者为高,血液学方面亦有变化,白细胞数增加、嗜酸粒细胞减少、中性粒细胞及单核细胞增多、血红蛋白偏高、平均红细胞体积偏高。吸烟组血浆硫氰酸盐浓度明显高于非吸烟组。
3.药物
药物对检验的影响非常复杂,在采样检查之前,以暂停各种药物为宜,如某种药物不可停用,则应了解可能对检验结果产生的影响。庆大霉素、氨芐青霉素可使谷丙转氨酶活性增高、咖啡因可使胆红素增加、维生素C可使血糖、胆固醇、甘油三脂、尿酸严重降低。
4.体位
体位影响血液循环,由于血液和组织间液因体位不同而平衡改变,则细胞成分和大分子物质的改变较为明显,例如由卧位改为站位,血浆ALB、TP、酶、Ca、胆红素、Tch及TG等浓度增高;Hb、HCT、RBC等亦可增加。由于体位的因素,在确立参考值时,应考虑门诊和住院病人可能存在的结果差异,故采集标本时要注意保持正确的体位和保持体位的一致性。5.时间
病人准备还应考虑病人的生物钟规律,特别是激素水平分析,如女性生殖激素与月经周期密切相关;胆固醇则在经前期最高,排卵时最低;纤维蛋白原在经前期最高,血浆蛋白则在排卵时减少。生长激素于入睡后会出现短时高峰。胆红素、血清铁以清晨最高;血浆蛋白在夜间降低;血Ca往往在中午出现最低值。故采血时间应在相同时间进行。
标本采集是直接关系检验结果的基本要素,如果标本采集不当,即使最好的仪器设备也难以弥补在采集标本时引入的误差和错误。
现将各种标本的采集要点分述如下:
1.血液标本
标本采集注意事项:
(1) 采静脉血时止血带结扎过久,可引起误差。如以结扎1min的样品结果为基数,则结扎3min,可使血浆总蛋白增加5%,胆固醇增加5%,铁增加6%,胆红素增加8%,乳酸则不能使用止血带。
(2) 血清标本应避免溶血。许多物质红细胞内和血清中(血浆)的含量是不一样的。如ALT红细胞内比血清高出数倍。血钾、AST高出几十倍,而HDH则高出百倍以上,一旦溶血,特别是严重溶血,造成血清(浆)中这些物质的测定值增高,干扰测定结果。
细胞培养的样品要采用无菌技术,防止污染。
(4) 标本采集后,必须在试管或容器上帖上检验申请单号码、住院病人应有床号、姓名,且应当场核对无误。
(5) 采血顺序:摘自北京协和医院检验科《检验样本留取及采集指南》。
①血培养管,
②凝血项目管(蓝帽),
③血沉管(黑帽),
④血清管(红帽或黄帽),
⑤肝素血浆管(绿帽),
⑥EDTA 管(紫帽),
注:采用注射器采集血培养时,厌氧瓶优先。
特殊情况采用蝶翼方式采血,且无血培养管时,顺序如下:
①凝血项目管(蓝帽),
②血沉管(黑帽),
③血清管(红帽或黄毛),
④肝素血浆管(绿帽),
⑤EDTA 管(紫帽),
注:采用蝶翼方式采集血培养时,需氧瓶优先。
在实际工作中,如患者静脉条件较差,有可能采血不足,血培养优先考虑需氧管,其它管应首先考虑凝血(蓝帽)和血沉(黑帽)检测管,因为这两种标本对血量要求最严格,且二者抗凝剂均为枸橼酸钠。
根据采集时间可分为清晨空腹尿、随机尿、计时尿(2h、3h、12h、24h等)、午后尿、餐后尿、症状典型时尿等。
(1) 晨尿为住院病人留尿的主要方法,早晨起床后收集第一次尿,可用尿常规检验。
(2) 随机尿多为门诊就诊病人的留尿检验方法。
(3) 餐后尿为收集进餐后2h尿,主要用于了解葡萄糖代谢情况,用以筛查隐性糖尿病或轻症糖尿病。
(4) 计时尿应于计时开始时排空尿液,然后于规定时间内至截止时间留尿,计时尿多用于肾功能和有形成分排出率的评估,亦用于计算淀粉酶或肌酐的排出率。
采集后及时送检,如作原虫阿米巴检查应保持一定的温度,且立即送检,立即检查,如检查蛲虫则不必送检粪样,而应于晨起时排便前用棉拭擦肛门周围,可得虫卵。粪便标本应不污染容器外表,一般以无滤漏容器留取5~10g即可。
均由临床医师穿刺采样,检验科应提供专用的各种试管或容器,及时送送检。
5.痰液标本
采集晨间第一口痰,多用于细胞学及微生物学检查。采样前应先反复漱口,经深呼吸数次后用力咳痰,不可吐入唾液。微生物培养取样应在抗生素等药物治疗开始之前,如已使用抗菌药物,则应选血液药物浓度最低水平时采样。
由妇产科医师采样后即时送检,否则影响滴虫动力,易于漏检。
根据具体检验项目而定,临床医师在开申请单前,应同检验科相关部门联系并询问详细后,注明检查要求,再采样并及时送检。
总之,各种检验标本的采集合适与否,直接关系检验质量,应予以重视。
三、标本保存和运送
标本保存和运送是检验质量保证的重要环节之一。由于采集的标本受各种因素的影响,可能使检验结果受或大或小的误差,因此必须正确掌握标本保存和运送。标本采集后尽量立即送检,如在室温放置时间过长会造成血液成分的变化(如血糖及酶活性降低),也可造成溶血现象。
(1) 采样后须立即送检的常规项目:血氨、血沉、血气分析、酸性磷酸酶、乳酸以及各种细菌培养,特别是厌氧菌培养。(2) 采样后0.5h内送检的常规项目:血糖、电解质、血液细胞学、凝血试验、体液细胞学、涂片找细菌、霉菌等。
(3) 采样后1~2 h内送检的常规项目:各种蛋白质类、色素类、激素类、脂类、酶类、抗原、抗体测定等。